广州找人代生男孩 PCR 分子检测的趋势:免核酸提取直接扩增 & 干燥型可常温运储

2024-06-21 13:29:08      点击::66

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PCR 核酸检测技术现已被广泛用于疾病检测,基因检测, 病毒和病原菌检测、转基因食品检测、遗传病、癌症基因检测,动物检测,食品及环境检测等各个领域。传统 PCR 分子检测试剂盒一般需要-20℃ 左右的冷链储运,以确保试剂有效成分的生物活性。这不仅成本高,而且环境温度的变化造成试剂反复冻融会直接影响检测试剂的性能和保质期。对液体试剂进行干燥后可常温运输和储存, 能很好地解决冷链运输的问题,并且干燥型试剂的优势还包括,更长的保质期,以及更灵活的加样量从而更高的检测灵敏度。 可干燥的 qPCR 试剂配方必须要保证酶在经过干燥后的稳定性,同时保证干燥试剂能快速水化并且性能不受影响。干燥型分子诊断试剂在国际 IVD 诊断、动物疾病诊断、食品卫生等领域都广泛应用,很受欢迎,是今后分子核酸检测的大方向。

 

干燥分子试剂有两种技术:冻干和风干。两种技术各有优势(见下图)

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关于冻干

越来越多的 IVD 企业认识到常温稳定检测试剂的优势,很多公司已经开始使用冻干技术开发常温稳定的分子检测试剂,并且有很多已经运用到新冠核酸检测中。 可冻干技术的特点是通过低温冷冻的方式将 PCR 液体试剂干燥成粉状、饼状或球粒状,干燥物可迅速被复溶,并可用于开发自动化高通量的多重检测。迈迪安生物技术在研发冻干试剂方面有着多年专业丰富的经验和技术,已有一些系列不含甘油并使用专门冻干辅料配制的 qPCR/RT-qPCR 预混液、聚合酶、逆转录酶、Bst 酶及缓冲液。干燥后的试剂可在常温下保持至少 24 个月稳定性, 37oC 条件下可保持 3 个月以上稳定性,并且具有较高的抗抑性,意味着可以用于血液、唾液等样本的免核酸提取直接扩增。 迈迪安目前已与国内外多家大型体外检测公司达成合作,该系列冻干试剂被用于多种获得国内外认证的新冠核酸试剂检测盒中,并且表现卓越。

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关于风干

由于对冻干操作环境、技术和设备专业的要求,很多诊断公司不得不把冻干服务外包给第三方,这在一定程度上限制了该技术在 POCT 方面的拓展,是打入常温稳定的干燥型检测市场的一个障碍。通过中高温烘干液体试剂的风干法,则是开发干燥型试剂的另一个选择。它不需要过多的化学或物理专业知识, 只需要使用到精密烘箱和天平即可进行烘干操作,因此在任何实验室中都可以完成干燥型检测的开发。由于风干技术成本更低且更易操作,诊断制造商可以更容易开发常温稳定的分子检测。 研发可风干的分子试剂最关键的是要保证预混液得到充分的干燥以除去多余的水分,但又不能过度干燥而影响酶的性能。 迈迪安研发生产到可风干qPCR预混液中使用了专门的无甘油聚合酶和先进的缓冲液成分,从而使酶在高温和脱水的情况下依然可以保持它的活性。经过大量测试广州找人代生男孩,迈迪安科研人员开发出了含有最优风干赋形剂和增强剂的配方,甚至能够在单管中同时干燥Taq聚合酶和逆转录酶,保证酶的稳定性,并且可以被快速复溶和激活。风干后的试剂反应性能和液体试剂保持一致的性能,且常温下可储存至少12个月。  

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除了对 qPCR 分子试剂的剂型从液体到干燥型到需求以外,对样本进行检测到处理操作上也要求越来越简便, 以更便于用于 POC 检测中。 在一般 qPCR 检测中,需要使用专用的试剂盒从待检样品中提取其核酸(DNA / RNA),并经过纯化等复杂的操作(通常称为前处理操作)之后才可以进行 qPCR/RT-qPCR。如果直接对样本进行检测,样本中的 PCR 抑制剂会降低灵敏度和准确性,因此核酸提取是移除这些 PCR 抑制剂的必要步骤;然而核酸提取是一个有局限性的步骤,DNA 或 RNA 可能在提取过程中损失,从而降低了分子检测的灵敏度。 为了解决这个问题☛ 迈迪安公司开发了抗抑性的 qPCR/RT-qPCR 试剂,可适用于对富含抑制剂的唾液,痰液和粪便样本进行直接高灵敏地多重检测。  

更重要的是,迈迪安还推出了一系列针对不同样本类型(唾液、痰液、血液和植物)的可风干直扩型 qPCR 试剂。  

截止目前为止,迈迪安公司可风干分子检测试剂家族已经包含有:

可风干 qPCR/RT-qPCR 预混液 (点击查看)

可风干 qPCR 血液直扩预混液(点击查看)

可风干植物直扩 qPCR 预混液(点击查看)

NEW 可风干唾液直扩 qPCR 预混液广州找人代生男孩

该系列试剂同时结合了迈迪安两大核心技术---抗抑性(免核酸提取直接扩增)和可风干的优势,为开发生产常温稳定、高灵敏度、并且节省成本的分子检测提供了理想的解决方案。用户在开发常温稳定的检测时,  在可风干直扩 qPCR 预混液里加入引物和探针,然后分装在反应容器中(例如:PCR 试管)后进行烘干干燥。检测时,只需将粗裂解样本直接加入干燥后的预混液中,无需进行核酸提取即可直接从样本中直接进行 DNA/RNA 定量的 qPCR/RT-qPCR 检测,  是用来对病毒、细菌和寄生虫等病原体进行高度灵敏检测的理想选择。既减少了样本处理时间,又可以以干燥检测的形式使用,增加样本的灵活性和检测灵敏度,避免了冷链储运,因此为更高效快速的 qPCR 分子检测提供了理想的解决方案,尤其是 POCT 平台的理想选择。干燥后的试剂和液体试剂具有相同的灵敏度、多重检测能力和抗抑性能,并且可在常温下保存至少 12 个月。   ———————————————— 迈迪安生物科技公司(Meridian)去年起向市场推出了可风干 qPCR/RT-qPCR 试剂和可风干血液、植物直扩 qPCR 预混液之后,美国辛辛那提时间 6 月 30 日,可风干直扩系列又增新品:   可风干唾液直扩 DNA/RNA qPCR 预混液 Air-Dryable™ Direct DNA/RNA Saliva qPCR Mixes 该试剂有两款,一款专门适用于 DNA 模板(MDX130),另一款为可同时适用于 RNA 和 DNA (MDX131, 含逆转录酶)。 该产品不含甘油,具有抗抑性,是专门为开发从唾液或痰液样本中免核酸提取、进行 DNA/RNA 直扩的常温稳定型检测设计的一款 qPCR 试剂。并且,迈迪安预计在接下来几个月中还将会推出分别专门针对粪便样本的可风干直扩 qPCR/RT-qPCR 预混液(抗抑性)!相信迈迪安研发的该系列针对各种不同样本类型的可风干直接扩增分子试剂将为分子诊断检测带来革命性的拓展。  在过去的十年里,唾液由于其无创、易采集、易运输作为诊断样本被广泛使用于检测研究。类似于血清, 唾液含有激素、抗体、生长因子、酶和微生物,可作为疾病检测的生物标志物。但是由于分析物浓度低,PCR 抑制剂浓度高,是唾液样本用于分子检测的挑战。因此,通常需要繁琐的样品准备步骤来均质标本和充分纯化 DNA/RNA。 迈迪安新开发的可风干唾液直扩 DNA/RNA qPCR 预混液含有独特的配方,可以直接从唾液或痰液的粗样里灵敏地检测靶标 DNA 或 RNA。该预混液是专门为克服唾液样本中的抑制物设计的,只需要添加引物和探针而无需进一步优化。此外,该产品既可以直接以液体形式使用,也可以通过烘箱或空气干燥成常温稳定的干燥型检测。 更多迈迪安产品介绍和信息,可进入迈迪安的丁香通商铺进行进一步了解:https://www.biomart.cn/68515/index.htm 关于迈迪安生物科技 美国迈迪安生物科技是一家大规模生产各种抗体,各种病毒抗原,各种重组蛋白质,各类 PCR 多聚酶,各种核苷酸和体外诊断关键试剂的大型领军企业。40 年以来,迈迪安生命科学公司始终坚持以提供创新的生命科学解决方案和建立值得信赖的合作伙伴关系为我们的宗旨。我们的重点是为体外诊断试剂公司提供优质的原料和服务,使其有助于推动这些领域的发展。